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產(chǎn)品名稱：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT)測(cè)試盒說明書

規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣

測(cè)試方法:微量法、可見分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6415

測(cè)定意義

GPT（EC 2.6.1.2）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化氨基酸和酮酸轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，在氨基酸代謝中具有重要作用。此外，哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞GPT活性很高，當(dāng)肝細(xì)胞壞死，GPT釋放到血液中，血清GPT活性顯著增高。因此，GPT被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害最敏感的檢測(cè)指標(biāo)。

測(cè)定原理

GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，生成丙酮酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基肼溶液，不僅終止上述反應(yīng)，而且與酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在堿性條件下呈紅棕色，可以在505nm讀取吸光值并計(jì)算酶活力。

試驗(yàn)中所需的儀器和用品

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或*將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化P63抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG/Biotin 生物素化兔抗小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體 Anti-CXC-R1 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

FLASH 英文名稱： 半胱酸蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Vimentin (Ser56) 磷酸化波形蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG/Biotin 生物素化兔抗小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬蛋白酶13抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Angiopoietin 2 血管生成素2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Beta-Catenin(Ser45) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

單組分TMB底物液 12ml/100ml 進(jìn)口分裝

VSIG4 英文名稱： T細(xì)胞負(fù)調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.1ml

DLGAP2 英文名稱： PSD95結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml

Anti-Angiopoietin 2 血管生成素2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Synaptojanin 2 英文名稱： 磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5H抗體 0.2ml

Estrogen Receptor alpha 英文名稱： 雌受體α抗體 0.1ml

組織蛋白酶D抗體 Anti-cath-D/CD/Cathepsin D 0.1ml

Anti-UCP-1/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-HMGCR(Ser872) 磷酸化三羥基基A還原酶抗體 規(guī)格 0.1ml

CCR-4(C-C chemokine receptor 4) 細(xì)胞表面趨化因子受體4抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT)測(cè)試盒說明書對(duì)氨基酚(>98%,BR)人絨毛膜促性腺（曾用名：絨促性素）凍切片組織組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

1,4-雙(5-苯基-2-噁唑基)苯(>98%,Scint Grade)內(nèi)素石蠟切片組織組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

(>98%,BC)內(nèi)素 載玻片組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

氟化(>98%,BR)內(nèi)素 凍切片組織組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

2,5-二苯基惡唑(>98%,BC)不銹鋼筒 石蠟切片組織組蛋白H3-K4甲基化NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

乙酸鈉(>98%,BR)封口膜 組蛋白H3-K4甲基化比色法定量檢測(cè)試劑盒?。ㄡ槍?duì)一甲基）

司班60鋁薄紙 組蛋白H3-K4甲基化比色法定量檢測(cè)試劑盒（針對(duì)二甲基、基）

二氧化鈦(>99%,BR)無熱原吸頭 組蛋白H3-K4甲基化熒光定量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。