參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：疙瘩皮膚病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Lump Skin Disease Virus(LSDV)
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機(jī)型決定，具體見使用方法）。
產(chǎn)品及特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

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實(shí)驗(yàn)過程：
一、疙瘩皮膚病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的DN段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽性對(duì)照），一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）。可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行）
10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照，6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照，并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
非模式菌株研究子囊英文名稱: Anti-TP73 Polyclonal Antibody分子式：C37H40N2O6性狀：Powder純度：98.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗羊IgG英文名稱: Anti-GPR39 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式：C7H14ClNO2性狀：Powder純度：99.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗羊IgM英文名稱: Anti-TPSB2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式：C33H36N4O6性狀：Orange powder純度：98.5%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG英文名稱: Anti-SLC4A2 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式：C16H17NO4性狀：Powder純度：99.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豬IgG宿主: Mouse 英文名稱: Anti-VIM Monoclonal Antibody分子式：C5H5N5性狀：Powder純度：98.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG宿主: Mouse 英文名稱: Anti-CYCS Monoclonal Antibody分子式：C16H17N3O2性狀：Powder純度：98.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗牛IgG宿主: Mouse 英文名稱: Anti-RELA Monoclonal Antibody分子式：C7H10ClN性狀：Powder純度：%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgG英文名稱: Anti-AKT1+2+3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式：C22H27N3O3性狀：Powder純度：98.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgM英文名稱: Anti-GFP tag Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式：C21H23NO8性狀：Powder純度：%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗兔IgG宿主: Mouse 英文名稱: Anti-KRT18 Monoclonal Antibody分子式：C15H20N2O4S2性狀：Powder純度：%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗兔IgM英文名稱: Anti-FLAG Tag Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式：C46H58N4O9性狀：Powder純度：97.5%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG宿主: Mouse 英文名稱: Anti-PIK3CG Monoclonal antibody分子式：C19H16ClNO4性狀：Red powder純度：98.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗羊IgG英文名稱: Anti-β-actin Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式：C7H8N4O2性狀：Powder純度：99.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗大鼠IgG英文名稱: Anti-HSP70 Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式：C23H26N2O4性狀：Powder純度：98.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗雞IgG英文名稱: Anti-CD206 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式：C17H21NO4性狀：Powder純度：99.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗牛IgG英文名稱: Anti-NPR1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式：C20H16N2O5性狀：Yellow powder純度：98.0%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗人IgG英文名稱: Anti-DiMethyl-Histone H4-K20 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式：C16H17NO3性狀：Solid純度：%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗人IgM宿主: Mouse英文名稱: Anti-TRIM28 Monoclonal Antibody分子式：C15H17NO2性狀：Powder純度：97.5%
Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗兔IgG英文名稱: Anti-MonoMethyl-Histone H4-K20 Polyclonal?類酵母菌。

非模式菌株研究子囊菌類酵母菌。飼料酵母,含蛋白質(zhì)55%
疙瘩皮膚病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒Lipocalin-2抗體　Lipocalin-2 Antibody，Lcn2，Lcn 2，Lipocalin2，Lipocalin 2

Lipin2抗體　Lipin 2 Antibody，KIAA0249，LPIN2

lin-7同源物A　LIN7A Polyclonal Antibody

Lin28抗體　Lin28 antibody

LIM域*蛋白7　LMO7 Polyclonal Antibody

LIM域激酶2(phosphoThr505)　LIMK-2 (phospho Thr505) Polyclonal Antibody

LIM域激酶1/2(phosphoThr508/505)　LIMK-1/2 (phospho Thr508/505) Polyclonal Antibody

LIM域激酶1(phosphoThr508)　LIMK-1 (phospho Thr508) Polyclonal Antibody

LIM域和肌動(dòng)蛋白結(jié)合1　LIMA1 Polyclonal Antibody