【產(chǎn)品名稱】雷氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Providencia rettgeri
【產(chǎn)品編號】YSP7116
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測，所用儀器為實(shí)時熒光PCR儀，可通過實(shí)時擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時熒光PCR技術(shù)，針對鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針，通過實(shí)時熒光一步法RT-PCR（Taqman探針法）對鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板，擴(kuò)增β-actin基因，與同類產(chǎn)品相比，UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號更強(qiáng)，擴(kuò)增效率更高。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
雷氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

實(shí)驗(yàn)步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板；
（2）引物與模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
Protopanaxatriol胰蛋白酶檢測試劑盒20mg

 SKIRROW氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)/空腸彎菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Skirrow Medium Base用于空腸彎菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

Ginsenoside Rd巴芬標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格：規(guī)格：人重組醛糖還原酶(AKR1B1)Polyclonal Antibody 0.2ml

ADMA(Human asymmetrical dimethylarginine) ELISA Kit  人不對稱二基精氨CAS號：1450959NADP蘋果脫氫酶檢測試盒1KUHuman/人Elisa試盒3140736

Protopanaxdiol胰蛋白酶原Ⅱ檢測試劑盒20mg

利那洛肽 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Linaclotide

Ginsenoside- Rf巴芬相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格：規(guī)格：人脂聯(lián)素受體蛋白1 Polyclonal Antibody 0.2ml

ST(Human Serotonin) ELISA Kit  人血清素/血清胺CAS號：1450959甘油醛脫氫酶檢測試盒200UHuman/人Elisa試盒3140930

98%250mg500g膠原酶inhibitory subunit of nuclear factorkappa B

 HL-7702(人肝正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Gastrin  胃泌素（抗原）*Krueppel樣子4檢測試盒1gHuman/人Elisa試盒500221

≥97%(HPLC)1g100g膠原酶Minichromosome Maintenance Deficient 2

阿克泰(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%) 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% Thiamethoxam

AMACR/P504S(alphamethylacylCoA racemase)  α基?；o酶A消旋酶抗原進(jìn)口、分裝精子頂體酶檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒50033

DABCYL 20mg

 MV3(人黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein)  膠質(zhì)纖維性蛋白（抗原）進(jìn)口、原裝犬狂犬病IgG抗體檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒50033
雷氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒卡那替尼βNaphthoflavone250MG通用試劑

卡培他濱2,5Diaminotoluene sulfate,97%25G通用試劑

卡培他濱（標(biāo)準(zhǔn)品）1Vinyl2pyrrolidinone,≥99%10G通用試劑

卷曲1Vinyl2pyrrolidinone,≥99%100ML通用試劑

卷曲(標(biāo)準(zhǔn)品)Polylactic acid,Mw ~60,0001G通用試劑

卡立普多4′Hydroxy3′methoxyacetophenone,98%25G通用試劑

卡立普多（標(biāo)準(zhǔn)品）EDTA,3Na,≥98.0%25G通用試劑

卡維地洛Sodium thiomethoxide,95%1G通用試劑

卡維地洛（標(biāo)準(zhǔn)品）3Acetyldeoxynivalenol,98%1MG通用試劑

西地尼布9Aminoacridine hydrochloride monohydr...5G通用試劑

塞來昔布，塞內(nèi)昔布，賽利克西3Pyridylacetic acid hydrochloride,98%1G通用試劑

塞來昔布，塞內(nèi)昔布（標(biāo)準(zhǔn)品）Sodium 2oxobutyrate1G通用試劑

鹽金,鹽氯四環(huán)素Sphingomyelin,≥97.0%25MG通用試劑

鹽金(標(biāo)準(zhǔn)品)NAcetyl4piperidone5G通用試劑

西洛他唑2Methylresorcinol,≥98.0%25G通用試劑
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。