公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：睪蛋白(TEST1)重組蛋白   

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Testisin (TEST1)

ESP-1; PRSS21; Protease, Serine 21; Eosinophil serine protease 1

酶與激酶

相關(guān)產(chǎn)品：
脂肪酸去飽和酶1(FADS1)卵白蛋白偶聯(lián)物Recombinant Matrix Metalloproteinase 23B (MMP23B)

脂肪酸羥化酶(FAAH)重組蛋白Recombinant Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11)

脂肪酸合酶(FASN)重組蛋白Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)

脂肪酶I(LIPI)重組蛋白Recombinant Maltase-glucoamylase (MGAM)

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達蛋白的分析、純化、檢測

　　誘導(dǎo)表達成功后，表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點：

標(biāo)記：標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記：酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記：熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

ERK1產(chǎn)品名稱: 絲裂原活化蛋白激mei1(MAPK3/1)單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow

TMEFF1產(chǎn)品名稱: TMEFF1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

PAX8產(chǎn)品名稱: 配對盒基因8單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Rat

EPHB4產(chǎn)品名稱: 酪氨suan蛋白激mei受體B4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

CSB產(chǎn)品名稱: ATP依賴解旋meiERCC6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

A4GALT產(chǎn)品名稱: 乳糖神經(jīng)酰胺4-α-半乳糖基轉(zhuǎn)移mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig

英文名稱: Human IgE交叉反應(yīng): Human

C5ORF4產(chǎn)品名稱: 5號染色體開放閱讀框4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Rabbit

CSN7b產(chǎn)品名稱: 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白9復(fù)合體7b抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Sheep

C11ORF77產(chǎn)品名稱: 11號染色體開放閱讀框77抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
睪蛋白(TEST1)重組蛋白人Duffy血型趨化因子受體(DARC)ELISA試劑盒DARCDuffy血型趨化因子受體elisa kitHuman Duffy Blood Group Chemokine Receptor(DARC)ELISA Kit

人DR1關(guān)聯(lián)蛋白1(DRAP1)ELISA試劑盒DRAP1DR1關(guān)聯(lián)蛋白1ELISA試劑盒Human DR1 Associated Protein 1(DRAP1)ELISA Kit

人DNA指導(dǎo)聚合meiγ1(POLγ1)ELISA試劑盒POLγ1DNA指導(dǎo)聚合meiγ1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Polymerase DNA Directed Gamma 1(POLg1)ELISA Kit

人DnaJ/Hsp40同源物亞家族C成員12(DNAJC12)ELISA試劑盒DNAJC12DnaJ/Hsp40同源物亞家族C成員12elisa檢測試劑盒Human DnaJ/HSP40 Homolog Subfamily C, Member 12(DNAJC12)ELISA Kit

人Discs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5(DLGAP5)ELISA試劑盒DLGAP5Discs大同源物關(guān)聯(lián)蛋白5elisa kitHuman Discs, Large Homolog Associated Protein 5(DLGAP5)ELISA Kit