產(chǎn)品名稱：大鼠腹水癌細(xì)胞;LLC-WRC 256

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9883

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

VTG/FITC 熒光素標(biāo)記卵黃蛋白原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CK5(Cytokeratin 5) 細(xì)胞角蛋白5抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

14-3-3 蛋白抗體  14-3-3 protein 0.1ml

SEPT12 英文名稱： 細(xì)胞分化蛋白SEPT12抗體 0.2ml

Phospho-HER4 (Tyr1056) 英文名稱： 磷酸化HER4抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-FXYD1 (Ser88) 磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體 規(guī)格 0.1ml

CK5(Cytokeratin 5) 細(xì)胞角蛋白5抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

MMP-9 人血清金屬基質(zhì)蛋白酶-9Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 CYP2C19 細(xì)胞色素P450 2C19抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Newcastle disease virus 雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病毒)抗體 規(guī)格 1ml

Human tumour necrosis factor related weak inducer of apoptosis,TWEAK ELISA Kit 人壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子 96T

TECTB 英文名稱： 遺傳性耳聾β-tectorin抗體 0.2ml

CT-1/CTF1 英文名稱： 心肌營養(yǎng)素1抗體 0.1ml

 CYP2C19 細(xì)胞色素P450 2C19抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Mouse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FNDC4 英文名稱： Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白4抗體 0.2ml

纖維連結(jié)蛋白抗體  FN 0.1ml

 phospho-P53(pSer392)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化抑制基因P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-STAT5a(Tyr694) 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  mouse IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗小鼠IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
大鼠腹水癌細(xì)胞;LLC-WRC 256細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（次氯酸離子）20次兔子腸脂肪酸結(jié)合蛋白（iFABP）ELISA試劑盒,

凍切片氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（次氯酸離子）20次轉(zhuǎn)化生長因子β2（TGFβ2）ELISA試劑盒--動物，人

/酵母氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（次氯酸離子）20次白介素11（IL-11）ELISA試劑盒--動物，人

植物氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（次氯酸離子）20次角蛋白17（CK17）ELISA試劑盒--動物，人

活體組織氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（次氯酸離子）20次抗胰島素受體抗體（AIRA）ELISA試劑盒--動物，人

細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（過氧亞硝基陰離子）20次兒茶酚（CA）ELISA試劑盒--動物，人

凍切片氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（過氧亞硝基陰離子）20次D-正纈

活體組織氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（過氧亞硝基陰離子）20次N-乙酰-L-半胱

/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（過氧亞硝基陰離子）20次L-精L-天冬鹽

植物氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（過氧亞硝基陰離子）20次D-色氨醇

體液氧化應(yīng)活性氧（ROS）熒光測定試劑盒（過氧亞硝基陰離子）20次羥甲基瓊脂糖凝膠FF

細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)活性氧（ROS）比色法測定試劑盒（單線態(tài)氧氣）20次人谷胱甘肽（GSH）ELISA試劑盒, GSH ELISA

組織氧化應(yīng)活性氧（ROS）比色法測定試劑盒（單線態(tài)氧氣）20次人脂聯(lián)素（ADP）ELISA試劑盒, ADP ELISA

體液氧化應(yīng)活性氧（ROS）比色法測定試劑盒（單線態(tài)氧氣）20次人瘦素受體（LEPR）ELISA試劑盒,

植物氧化應(yīng)活性氧（ROS）比色法測定試劑盒（單線態(tài)氧氣）20次人凝溶膠蛋白（GS）ELISA試劑盒,

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。