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當(dāng)前位置:首頁(yè)技術(shù)文章小鼠鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒?標(biāo)本的采集與保存

小鼠鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒?標(biāo)本的采集與保存

更新時(shí)間:2022-01-11點(diǎn)擊次數(shù):438

小鼠鐵調(diào)素(Hepc)ELISA試劑盒標(biāo)本的采集與保存:


1.         血清:


將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置 2 小時(shí)或 4oC 過(guò)夜,然后 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。


2.         血漿:


用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的 30 分鐘內(nèi)于 2-8oC 1000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20oC或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。


3. 組織勻漿:


1) 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);


2) 可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨,該過(guò)程需在冰上進(jìn)行(有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融 進(jìn)一步處理(超聲破碎過(guò)程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2次)。


3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測(cè)。

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